@article { author = {}, title = {The effects of metformin and bee venom on in vitro maturation of isolated preantral follicles in mice}, journal = {Journal of Animal Research (Iranian Journal of Biology)}, volume = {26}, number = {3}, pages = {228-236}, year = {2013}, publisher = {Iranian Biology Society}, issn = {2383-2614}, eissn = {2383-2622}, doi = {2631}, abstract = {Metformin has multiple benefits in patients with type 2 diabetes. This drug is also used for treatment of patients with Polycystic ovarian syndrome (PCOS), menstruation cycles improvement and ovulation induction. Other studies showed that meformin cause meiotic progression of mice oocytes in in vitro condition via activation of Adenosin monophosphate-activated protein kinase (AMPK). Bee venom is a complex compound, consists of enzymes, proteins, peptides and cytokines. Our previous studies have showed the positive effects of bee venom on PCOS and development of ovarian follicles in Wistar rat model.  In this study, we focused on the effects of metformin and bee venom both; in development and surviving rate of mouse follicles and their maturation. Ovaries were taken from 14 days old mice. Then mechanically isolated preantral follicles were cultured in α-MEM supplemented with 5% FBS, 100 mIU/ml FSH, 1% insulin-transferrin-selenium under mineral oil for 14 days, and added 10-5 M metformin and optimum dose of 1 μg/ml  bee venom (based on dosimetric experiments) in treated groups. At day 12 of culture, final oocyte maturation and ovulation was induced by the addition of 1.5 IU/ml hCG and 20 ng/ml (Recombinant epidermal growth factor) rEGF. The in vitro effects of metformin and bee venom on mouse preantral follicular growth and subsequent oocyte maturation in all groups were assessed. Our findings showed that diameters of preantral follicles at day2 were increased in metformin group (P<0.01), bee venom group (P<0.05) and co-culture group (P<0.05) significantly. Follicular diameters in day4 also increased in metformin group (P<0.001), bee venom group(P<0.05) and co-culture group (P<0.01) significantly. Survival rates in metformin group and co-culture group increased, but this rate decreased in bee venom group, although there were no significant differences among groups. Germinal vesicle (GV) oocytes percentage in metformin group (P<0.001), bee venom group (P<0.01) and co-culture group decreased (P<0.01) significantly. MІ and MІІ oocytes percentage in all treated groups increased but they were not significant. Based of these results, it was shown that follicles treated by metformin and bee venom in vitro, grew more significant than control group. In addition ovulated oocytes treated by metformin and bee venom showed much higher meiotic progression, maturation and preparation for fertilization. Based of these data could conclude, metformin and bee venom have developmental effect on competence and maturation of ovarian follicles. Therefore, these data could be useful to improve our knowledge in infertility and menstruation disorders.}, keywords = {mouse preantral follicles,metformin,bee venom,in vitro maturation(IVM)}, title_fa = {بررسی تأثیر توأم متفورمین و زهرزنبور بر بلوغ آزمایشگاهی فولیکولهای پره آنترال موش}, abstract_fa = {متفورمین سالهاست که جهت کنترل دیابت نوع 2 استفاده می شود. این دارو همچنین در بهبود بیماران سندرم پلی کیستیک تخمدان(PCOS)، اعاده سیکلهای قاعدگی و القای اوولاسیون مؤثر بوده است. مطالعات نشان می دهد متفورمین از طریق فعال کردن پروتئین کیناز فعال شونده توسط آدنوزین مونو فسفات (AMPK)می تواند موجب پیشروی بلوغ میوزی تخمکهای موش در محیط  in vitro گردد. زهرزنبور ترکیبی پیچیده از آنزیمها، پروتئین، پپتید و سایتوکین ها است. مطالعات in vivo ما در تحقیقات قبلی حاکی از اثرات درمانی زهرزنبور بر بیماران PCOS و تکوین فولیکولهای تخمدان می باشد. با فرض تأثیر این دو بر رشد و میزان ماندگاری فولیکولهای تخمدان موش و نیز نرخ بلوغ تخمکها هدف این تحقیق بررسی اثر توأم متفورمین و زهرزنبور بوده است. بدین منظور فولیکولهای نابالغ از تخمدان موشهای 14 روزه خارج و در محیط کشت قطره ای α-MEM تحت روغن مینرال به مدت 14 روز کشت داده شد. متفورمین و زهرزنبور به طور جداگانه و نیز به صورت همزمان به محیط کشت فولیکول اضافه شد. قطر فولیکولها تا روز چهارم کشت و نیز میزان ماندگاری آنها به صورت هر دو روز یکبار بررسی و مورد سنجش میکروسکوپی قرار گرفتند. در روز دوازدهم به منظور القای اوولاسیون از hCG و rEGF استفاده شد و وضعیت تخمکهای اووله شده بررسی گردید. یافته ها نشان داد که قطر فولیکولها در روز دوم کشت در اثر تیمار با متفورمین)01/0< (P ، زهرزنبور)05/0< (P و در گروه توأم )05/0< (P به طور معنی داری افزایش یافت. در روز چهارم کشت نیز رشد فولیکولها در گروه متفورمین )001/0< (P، زهرزنبور)05/0< (P و در گروه توأم )01/0< (P افزایش معنی داری را نشان داد. درصد ماندگاری فولیکولها در هیچکدام از گروههای تیمار شده معنی دار نبود. درصد تخمکهای GV در گروه متفورمین)001/0< (P ، زهرزنبور)01/0< (P و در گروه تیماری توأم )01/0< (P به طور معنی داری کاهش یافت و در مقابل بر تعداد تخمکهای MІ و MІІ (مرحله متافاز І و ІІ) در هر سه گروه تیماری افزوده شد؛ هرچند که این افزایش معنی دار نبود. در ضمن اختلاف معنی داری در میزان تشکیل حفره آنتروم میان گروهها مشاهده نشد. بنابراین یافته های این تحقیق می تواند مؤید تأثیر همزمان متفورمین و زهر زنبور بر افزایش رشد فولیکولهای تخمدان در محیط in vitro و نیز افزایش پیشروی و بلوغ میوزی تخمک باشد که بر روی هم موجب آمادگی بیشتر آن برای لقاح می شود.}, keywords_fa = {زهر زنبور,فولیکولهای پره آنترال,متفورمین,کشت و بلوغ آزمایشگاهی فولیکولهای تخمدان}, url = {https://animal.ijbio.ir/article_227.html}, eprint = {https://animal.ijbio.ir/article_227_ba613f58c15b14b7186f04f42666fa36.pdf} }